Diferenciação miogênica “in vitro” de células tronco mesenquimais murinas de diferentes origens

Muscular dystrophy refers to a group of more than 30 genetical disorders characterized by progressive weakness and degeneration of the skeletal muscle. No effective therapy is available at present. Recent studies have reported that the transplantation of stem cells can offer an important potential therapy for genetic diseases. Adult bone marrow mesenchymal stem cells have been identified as a nonhematopoietic stem cell population capable of self-renewal with the ability to differentiate into many cell lineages, including bone, fat, cartilage and connective tissue. Because of their similarity with muscle progenitor cells, when they are injected in affected individuals, they are able to migrate into areas of skeletal muscle degeneration and participate in the regeneration process. The adipose tissue represents an alternative source of MSCs that, as the MSCs derived from bone marrow, are capable of in vitro differentiation into osteogenic, adipogenic, myogenic and chondrogenic lineages. The objective of this project is to investigate the “in vitro” myogenic potential of mesenchymal stem cells derived from murine bone marrow and adipose tissue. Four experimental groups were analyzed: mice from lineages Lama2dy-2J/J and C57black and, C2C12 lineage cells and transformed C2C12 expressing the eGFP protein. MSCs cultures were obtained by flushing the bone marrow femurs and tibials with α-MEM or by the subcutaneous and inguinal fat from the mice. Their characterization was done by flow cytometry and in vitro differentiation. Muscle differentiation was studied through the analysis of the expression of transcriptional factors involved in muscle differentiation and/or the presence and amount of specific proteins from muscle differentiated cell. The pluripotency from bone marrow MSCs of the two lineages was evidenced and, in the muscular differentiation... (Complete abstract click electronic access below)As Distrofias Musculares formam um grupo de mais de 30 doenças genéticas caracterizadas por fraqueza progressiva e degeneração dos músculos esqueléticos. Até a presente data, não há um tratamento que leve à cura das diferentes formas de distrofia. Recentes estudos têm mostrado que o transplante de células tronco pode oferecer um importante potencial terapêutico para as doenças genéticas. As células tronco mesenquimais do estroma da medula óssea adulta, têm sido identificadas como uma população de células tronco não-hematopoiéticas capazes de auto-renovação e diferenciação em várias linhagens celulares, incluindo osso, gordura, cartilagem e tecido conjuntivo. Por sua semelhança com células progenitoras de músculo, espera-se que quando injetadas em indivíduos afetados, sejam capazes de migrar para as áreas de degeneração do músculo esquelético e participar de processos de regeneração. O tecido adiposo constitui uma fonte alternativa de MSCs que, como as MSCs provenientes da medula óssea, são capazes de diferenciar in vitro em linhagens osteogênicas, adipogênicas, miogências e condrogênicas. O objetivo desse trabalho é investigar o potencial miogênico “in vitro” de células tronco mesenquimais isoladas de medula óssea e de tecido aidposo de camundongos. Foram utilizados 4 grupos experimentais: camundongos das linhagens Lama2dy-2J/J e C57black e, células da linhagem C2C12 e C2C12- eGFP transformada. As culturas de MSCs foram obtidas a partir de aspirado de medula óssea do fêmur ou a partir de gordura da região abdominal dos camundongos. A caracterização das mesmas foi feita através de citometria de fluxo e experimentos de diferenciação in vitro. A diferenciação em músculo foi estudada através da análise da expressão de fatores de transcrição envolvidos no processo de diferenciação muscular e/ou a presença... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo